載玻片是用顯微鏡觀察東西時用來放東西的玻璃片或石英片,制作樣本時,將細胞或組織切片放在載玻片上,將蓋玻片放置其上,用作觀察。在光學(xué)上, 用于產(chǎn)生相位差的一種類似玻璃材料的薄片。
蓋玻片是透明材料的薄且平的玻璃片,通常為方形或矩形,是蓋在載玻片上的材料上的,可以避免液體和物鏡相接觸,以免污染物鏡,并且可以使被觀察的細胞最上方處于同一平面,即:距離物鏡距離相同,使觀察到的圖像更清晰。
注意事項:
1、涂片法是將材料均勻地涂布在載玻片上的一種制片方法。
涂片材料有單細胞生物、小型藻類、血液、細菌培養(yǎng)液、動植物的疏松組織、精巢、花藥等。
涂片時應(yīng)注意:(1)載玻片必須清潔。(2)載玻片要持平。(3)涂層須均勻。涂抹液滴在載玻片中間偏右,用解剖刀刃或牙簽等涂勻。(4)涂層要薄。用另一載玻片作推片,沿滴有涂抹液的載玻片面(二載玻片夾角應(yīng)為30°-45°)由右向左輕輕推動,涂成均勻一薄層。(5)固定。如需固定可用化學(xué)固定劑或干燥法(細菌)固定。(6)染色。細菌用亞甲基藍,血液用瑞氏染液,有時可以可以使用碘酒。染色液要蓋住全部涂面。(7)沖洗。用吸水紙吸干或烤干。(8)封片。長期保存用加拿大的樹膠封片。
2、壓片法是將生物材料置于載玻片和蓋片之間,施加一定壓力,將組織細胞壓散的一種制片方法。
3、裝片法是將生物材料采取整體封固制成玻片標(biāo)本的方法,用此法可制成臨時或永久性裝片。
裝片材料有:微小生物如衣藻、水綿、變形蟲、線蟲;水螅,植物的葉表皮;昆蟲的翅、足、口器,人的口腔上皮細胞等。
裝片法制作時應(yīng)注意:(1)手持載玻片時,應(yīng)注意持平,或放在平臺上。滴水時水量要適當(dāng),以恰好被蓋玻片蓋滿為度。(2)應(yīng)將材料用解剖針或鑷子展開不使重疊,展平在同一平面上。(3)放蓋玻片時,從一側(cè)慢慢蓋在水滴上,防止出現(xiàn)氣泡。(4)染色時,將一滴染色液滴在蓋玻片的一側(cè),用吸水紙從另一側(cè)吸引,使蓋玻片下的標(biāo)本均勻著色。著色后,用同樣的方法,滴一滴清水,把染色液吸出后,在顯微鏡下觀察。
4、切片 是用從生物體上切取的薄片制成的玻片標(biāo)本。
因要求不同,可用刀片進行徒手切片,也可將組織塊包埋于石蠟或火棉膠中或以低溫冰凍,用切片機切片。切成5~10微米薄片,供光學(xué)顯微鏡觀察。用環(huán)氧樹脂或甲基丙烯酸包埋組織塊切制的超薄切片,其厚度在20~50納米,專供在電子顯微鏡下觀察。一般教學(xué)用的如根尖、莖的切片通稱石蠟切片。